Odpovědět:
Viz. níže…
Vysvětlení:
Restrikční enzymy štěpí ve specifických sekvencích, takže musí být použit stejný restrikční enzym, protože bude produkovat fragmenty se stejnými komplementárními lepivými konci, což umožní vytváření vazeb mezi nimi.
Existují určitá kompatibilní restrikční místa, která lze použít společně. Příklady Xho1 a Sal1 jsou příklady. Jejich lepkavé konce se shodují, a tak mohou být spojeny dohromady. Ale ligace zabíjí jak Xho1, tak Sal1 místo, takže nemůžete použít ani jeden z nich, aby se znovu rozřezal (na místech ligace).
Můžete také použít exonukleázu nebo PCR k vytvoření většiny lepkavých konců (5
nebo 3
převisy) do tupých míst - tímto způsobem můžete ligovat do místa tupého řezu - ale toto místo obecně zabije i tupé místo.
Jaký je rozdíl mezi "být" a "jsou"? Například, který z následujících je správný? "Je nezbytné, aby naši piloti BE měli co nejlepší výcvik." nebo „Je nezbytné, aby naši piloti měli nejlepší možný výcvik.“?
Viz vysvětlení. Být je infinitivní forma, zatímco oni jsou forma druhé osoby singulární a všechny osoby množný. Ve větě příkladu předchází sloveso piloti předmětu, proto je vyžadován osobní formulář ARE. Infinitiv je většinou používán po slovesech jako ve větě: Piloti musí být velmi zruční.
PBR322 je plazmid mající dvě restrikční místa pro EcoRI, zatímco T4 fágová DNA má pro něj tři restrikční místa. Tyto dvě DNA byly ošetřeny EcoRI a ponechány běžet na agarózovém gelu. Jaký vzor se získá na gelu?
Neplatná otázka, T4 má kolem 40 míst pro EcoR1, ne 3 ... pBR322 má pouze 1 místo pro EcoR1, mezi genem faktoru rezistence AMP a genem TET ... T4 digest: (děkuji, Springer Verlag!) obrázek pořízený z http://link.springer.com/article/10.1007/BF00272920 © Springer-Verlag 1981 Pokud je však vaše otázka hypotetičtější: oba pBR322 a T4-genomy jsou kruhové, takže: pBR322: 2cuts = 2 fragmenty, T4: 3cuts = 3 fragmenty. Na agarózovém gelu byste viděli 2 pruhy v pBR-pruhu, 3 pruhy v T4-pruhu, UNLESS 2 nebo více fragmentů mají stejnou nebo stejnou vel
Proč musíte použít stejný restrikční enzym na buňce dna a na plazmidu?
Restrikční endonukleáza identifikuje a štěpí stejnou palindromickou sekvenci jak v DNA, tak ve vektoru, díky čemuž, když budou smíšeny, jejich komplementární báze se připojí a vytvoří r-DNA, pokud jsou oba rozštěpeny různými RE, pak při smíchání se použijí. mezi sebou, protože jejich základny se neshodují.