PBR322 je plazmid mající dvě restrikční místa pro EcoRI, zatímco T4 fágová DNA má pro něj tři restrikční místa. Tyto dvě DNA byly ošetřeny EcoRI a ponechány běžet na agarózovém gelu. Jaký vzor se získá na gelu?

PBR322 je plazmid mající dvě restrikční místa pro EcoRI, zatímco T4 fágová DNA má pro něj tři restrikční místa. Tyto dvě DNA byly ošetřeny EcoRI a ponechány běžet na agarózovém gelu. Jaký vzor se získá na gelu?
Anonim

Odpovědět:

Neplatná otázka, T4 má asi 40 míst pro EcoR1, ne 3 …

pBR322 má pouze 1 místo pro EcoR1, mezi genem faktoru rezistence vůči AMP a genem TET … t

Vysvětlení:

T4 digest: (děkuji, Springer Verlag!)

obrázek pořízený z

© Springer-Verlag 1981

Pokud je však vaše otázka hypotetická:

genomy pBR322 i T4 jsou kruhové, takže:

pBR322: 2cuts = 2 fragmenty,

T4: 3 cuts = 3 fragmenty.

Na agarózovém gelu byste viděli 2 pruhy v pruhu pBR, 3 pruhy v pruhu T4, NEJLEPŠÍ 2 nebo více fragmentů má stejnou velikost nebo je téměř stejných.. V tomto případě migrují více méně stejnou rychlostí a budou nerozeznatelné. Relativní poměr G / C k A / T má také efekt.

Takže nakonec, pokud se fragmenty v tomto hypotetickém příkladu liší velikostí, 2 pásy pro pBR, 3 pro T4 …