Odpovědět:
Navzdory tomu, že jde o endonukleázu, tj. Enzym štěpící nukleovou kyselinu, restrikční endonukleáza náhodně nezničí molekulu DNA. Enzymy se štěpí pouze v palindromických sekvencích za vzniku menších fragmentů DNA.
Vysvětlení:
Restrikční enzymy se používají k řezání kruhové molekuly DNA prokaryotického původu. Tento typ endonukleázy často produkuje lepkavé konce, které pomáhají při tvorbě rekombinantní DNA, to znamená, že do řezu může být vložen cizí fragment DNA (obsahující požadovaný gen).
Technologie rekombinantní DNA otevřela nový horizont v biologické vědě.
PBR322 je plazmid mající dvě restrikční místa pro EcoRI, zatímco T4 fágová DNA má pro něj tři restrikční místa. Tyto dvě DNA byly ošetřeny EcoRI a ponechány běžet na agarózovém gelu. Jaký vzor se získá na gelu?
Neplatná otázka, T4 má kolem 40 míst pro EcoR1, ne 3 ... pBR322 má pouze 1 místo pro EcoR1, mezi genem faktoru rezistence AMP a genem TET ... T4 digest: (děkuji, Springer Verlag!) obrázek pořízený z http://link.springer.com/article/10.1007/BF00272920 © Springer-Verlag 1981 Pokud je však vaše otázka hypotetičtější: oba pBR322 a T4-genomy jsou kruhové, takže: pBR322: 2cuts = 2 fragmenty, T4: 3cuts = 3 fragmenty. Na agarózovém gelu byste viděli 2 pruhy v pBR-pruhu, 3 pruhy v T4-pruhu, UNLESS 2 nebo více fragmentů mají stejnou nebo stejnou vel
Proč jsou restrikční enzymy důležité pro rekombinantní DNA technologii?
Restrikční enzym je hlavním nástrojem rekombinantního dna technolog - všechny restrikční enzymy kontrolují molekulu DNA v serii specifické rozpoznávací sekvence. jakmile dostane specifickou rozpoznávací sekvenci, váže se na místo a štěpí každý ze dvou řetězců dvojité šroubovice ve specifických bodech hydrolýzou fosfodiesterových vazeb. OMEZUJÍCÍ ENZYMY JSOU VYZÝVANY JAKO MOLEKULOVÉ NÁŘADÍ.
Proč většina restrikčních enzymů štěpí v palindromické sekvenci?
Protože je efektivnější. Enzymy, jako jsou restrikční enzymy, musí rozpoznat velmi specifickou sekvenci, aby mohly splnit svůj úkol. Navazuje se na DNA pouze v jedné specifické konfiguraci. Naštěstí! protože nechcete 'pacman', který stříhá DNA na náhodných místech. DNA je dvouvláknová, takže má dvě strany, na které se může enzym vázat. Palindromická sekvence je na obou stranách stejná dozadu a dopředu (viz obrázek níže). To znamená, že enzym rozpoznává sekvenci bez ohledu na to, ze kter&