Co je to SDS-PAGE proteinů?

Co je to SDS-PAGE proteinů?
Anonim

Odpovědět:

Jedná se o separaci proteinů na základě jejich molekulové hmotnosti.

Vysvětlení:

SDS-PAGE je separace proteinů v elektrickém poli na základě jejich molekulové hmotnosti.

Proteiny se denaturují zahříváním na teplotu mezi 70 a 100 ° C v přítomnosti sloučenin, jako je 2-merkaptoethanol nebo dithiotreitol, a SDS (dodecylsulfát sodný). Merkaptoethanol nebo dithiothreitol rozbijí disulfidové vazby v proteinu a způsobí, že se rozloží a stanou se lineárními (jako dlouhý řetězec bez záhybů). SDS napomůže procesu rozvíjení a také pokryje protein v negativním náboji.

Směs se potom aplikuje na polyakrylamidový gel (PAGE bit v SDS-PAGE) a aplikuje se elektrický proud. Negativně nabité proteiny se budou pohybovat v elektrickém poli. PAGE zabrání tomu, aby se větší proteiny pohybovaly velmi rychle ve srovnání s malými proteiny (PAGE působí jako síto). Výsledkem bude, že velké proteiny zůstanou v blízkosti začátku gelu, zatímco malé proteiny se budou dále pohybovat do PAGE.

SDS-PAGE můžete vidět v níže uvedeném videu: