Odpovědět:
Chromatofokusace je metoda separace proteinů, která umožňuje rozlišení jednotlivých proteinů a jiných amfolytů z komplexní směsi podle rozdílů v jejich izoelektrických bodech.
Vysvětlení:
Tato technika byla zavedena Stuytermanem a jeho kolegy v letech 1977 až 1981. Chromatofokusace využívá iontoměničové pryskyřice a obvykle se provádí rychlou proteinovou kapalinovou chromatografií.
Využívá iontové výměny kolon a interně generovaný gradient pH, který prochází kolonou jako zadržená fronta. Interakce mezi gradientem pH a amfoterními látkami, jako jsou proteiny, způsobují, že tyto látky vystupují z chromatografické kolony v charakteristických místech ve výtoku jako zaostřené pásy.
Tato gradientová eluce chromatografickou technikou je účinným čistícím nástrojem, pokud jde o proteiny, protože může velmi podobné druhy rozdělit sotva se liší o 0,02 limitů pH, což nemusí dobře oddělit tradiční strategie iontové výměny.